ELISA試劑盒實驗做了很多次，可是結果還是有偏差？可能很多同學都會出現這樣的問題，那么問題到底出在哪呢，今天小編就來給大家總結一下，ELISA試劑盒實驗中會經常遇見的問題。
一、ELISA試劑盒簡介
酶聯免疫吸附測定是在免疫酶技術的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術。
二、ELISA試劑盒的應用
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現微量的免疫沉淀反應。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。
三、ELISA試劑盒實驗疑難問題解答
1.非正常的樣本值
①不正確的收集或保存
解決方案：確保正確的底物體積混合。如果底物是凍干粉，用相應緩沖液重懸*，充分混合并在一定時間內使用。
②不正確的樣本制備
說明書中樣本制備方法已經過性能測試驗證，嚴格按照說明書推薦進行。確保使用正確的校正稀釋液。
2.信號強度增長不充分
①底物準備有誤
解決方案：確保正確的底物體積并混合。如果底物是凍干粉，用相應緩沖液重懸，充分混合并在一定時間內使用。
②每孔底物添加體積有誤
解決方案：保證移液器正常工作，必要時進行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③孵育時間或溫度有誤
解決方案：嚴格按照推薦的孵育時間和溫度進行實驗，避免在環境條件變化的位置孵育96孔板（如放在通風處或窗臺邊）。
④偶聯物或底物準備有誤
解決方案：確保混合相同體積的偶聯物和底物。加入后會立即顯色。底物在使用前應避光保存。
⑤儀器設置不正確
解決方案：確保酶標儀使用了正確的濾光片，確保按照說明書，正確的配置儀器參數。
3.邊緣效應
①工作臺溫度不均衡
解決方案：避免在環境條件變化的位置孵育，如放在通風處或窗臺邊。
②體系液體蒸發
解決方案：保證移液器正常工作，必要時進行重新校正。保證移液器吸頭連接緊密。
③疊板孵育時避免疊板。
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