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在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),區(qū)分細(xì)胞類型非常重要。常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)類型有原代細(xì)胞、細(xì)胞系這兩種,它們之間有啥區(qū)別呢?如何通過(guò)細(xì)胞特征來(lái)分辨?本文為大家詳細(xì)介紹一下細(xì)胞系和原代細(xì)胞之間的區(qū)別。
定義:原代細(xì)胞是直接從活體組織(如皮膚、內(nèi)臟、血液等)通過(guò)酶消化(如胰蛋白酶)或機(jī)械分離法獲取的單細(xì)胞,首次在體外培養(yǎng)的細(xì)胞。
生命周期:原代細(xì)胞的分裂能力有限,其可傳代次數(shù)因細(xì)胞類型、來(lái)源(如供體年齡)和培養(yǎng)條件等因素而異,通常在進(jìn)入衰老前只能進(jìn)行數(shù)十次分裂。
定義:細(xì)胞系是指原代細(xì)胞經(jīng)首次傳代成功后建立的細(xì)胞群體。根據(jù)其增殖潛能,細(xì)胞系可分為兩類:
有限細(xì)胞系:它們是原代細(xì)胞傳代后直接形成的,增殖能力有限,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的分裂后會(huì)進(jìn)入衰老期。
無(wú)限細(xì)胞系:它們是有限細(xì)胞系在培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生轉(zhuǎn)化,或直接來(lái)源于腫瘤組織,從而獲得了無(wú)限增殖能力的細(xì)胞群體,可以被永久傳代培養(yǎng)。
難點(diǎn):分離技術(shù)要求較高(需無(wú)菌、快速操作),貼壁率低,存活時(shí)間短,需優(yōu)化培養(yǎng)基成分(如添加生長(zhǎng)因子)
成本:細(xì)胞來(lái)源活體,取材成本較高,培養(yǎng)試劑較為昂貴。
優(yōu)勢(shì):標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)流程,適合常規(guī)培養(yǎng)基(如DMEM+10%胎牛血清),易于凍存和復(fù)蘇。
成本:價(jià)格低廉、可大規(guī)模擴(kuò)增。
原代細(xì)胞的適用場(chǎng)景:
藥物研發(fā):更精準(zhǔn)預(yù)測(cè)體內(nèi)藥效/毒性(如藥物EC50值在細(xì)胞系與原代細(xì)胞間差異顯著)
個(gè)性化醫(yī)療:患者來(lái)源的原代細(xì)胞(PDCs)用于個(gè)體化藥物篩選(如膽管癌對(duì)雷公藤紅素的敏感性測(cè)試)。
基礎(chǔ)研究:細(xì)胞分化、信號(hào)通路、代謝研究(如脂代謝模型需原代脂肪細(xì)胞)
局限:批次間差異大,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性低。
細(xì)胞系的適用場(chǎng)景:
高通量篩選:大規(guī)?;蚓庉嫞ㄈ?/font>CRISPR/Cas9文庫(kù)篩選)、藥物初篩。
機(jī)制研究:過(guò)表達(dá)/敲除基因的功能驗(yàn)證(如NG108-15細(xì)胞用于神經(jīng)內(nèi)分泌研究)
局限:遺傳漂變可能導(dǎo)致結(jié)論偏差,體內(nèi)外結(jié)果一致性低。
鑒于原代細(xì)胞和細(xì)胞系在生物學(xué)特性上存在本質(zhì)區(qū)別,這會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的有效性和結(jié)果的可靠性。因此,無(wú)論是實(shí)驗(yàn)室的新手還是資深研究者,都必須掌握準(zhǔn)確辨別并正確處理這兩種細(xì)胞的能力,這一點(diǎn)至關(guān)重要。
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