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553-24-2/中性紅的原理與用途

中性紅是一種組織學復染色染色劑,可用來為溶酶體、高爾基體和尼斯爾氏粒染色,同時也是酸堿指示劑。

中性紅也是一種活體染劑,因為隨著細胞逐漸死亡,它們吸收中性紅的能力也會變差。

中性紅的原理與用途

原理

中性紅是一種弱堿性 pH 指示劑,變色范圍 pH6.4~8.0之間(由紅變黃)。在中性或微堿性環境中,植物的活細胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌,由于液泡在一般情況下呈酸性反應,因此,進入液泡的中性紅便解離出大量陽離子而呈現櫻桃紅色,在這種情況下,原生質和細胞壁一般不著色;死細胞由于原生質變性凝固,細胞液不能維持在液泡內,因此,用中性紅染色后,不產生液泡著色現象,相反,中性紅的陽離子,卻與帶有一定負電荷的原生質及細胞核結合,而使原生質與細胞核染色。

制備

中性紅是由N,N-二甲基對亞硝基苯胺鹽酸鹽與甲苯-2,4-二胺制取。

將二甲基苯胺加到5℃的鹽酸水溶液中,攪拌使之溶解,然后邊攪拌邊加入亞硝酸鈉水溶液進行反應,溫度控制在5~10℃:

中性紅的原理與用途

攪拌反應1H后,過濾,結晶對亞硝基二甲基苯胺鹽酸鹽用少量水洗滌后備用。將硫酸亞鐵用90℃熱水溶解,然后加入2,4-二氨基甲苯,充分攪拌溶解后,慢慢加入制得的對亞硝基二甲基苯胺鹽酸鹽,攪拌反應:

中性紅的原理與用途

1h后,補加適量鹽酸,過濾。濾液中通入氯化氫氣體,靜置,待結晶完全后過濾,干燥,即為中性紅成品。

用途

1.用作酸堿指示劑,變色范圍pH值6.8(紅)~8.0(橙黃);氧化還原指示劑;活體及細胞的染色劑。

2.用作萃取光度法測定碘、汞等的試劑。還用作生物染色劑。

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