17372-87-1 / 伊紅Y（水溶）的配制法

背景及概述^[1]

伊紅是由醌式苯環結構的發色基團和鹵素原子溴及鈉鹽的助色基團所組成的酸性染料。伊紅是人工合成的化學試劑，外觀呈磚紅色或醬紅色結晶體。屬熒光酚酞衍生物類，具有綠黃色熒光。其共有4種類型，即伊紅Y、伊紅B、甲基伊紅及乙基伊紅。雖然4種類型伊紅化學作用有相似之處，但伊紅Y是與蘇木精配對最理想的對比染料。其在水中離解成帶負電荷的陰離子，與蛋白質的氨基正電荷(陽離子)結合而使細胞質染色，細胞質、紅細胞、肌肉、結締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍色的細胞核形成鮮明的對比。因此伊紅是最常用的胞質染料之一。

HE染色效果除與組織是否新鮮、固定是否及時以及脫水包埋過程是否恰當有關外，染色液的配置和使用也是重要的環節之一，染色液的質量最終決定染色的效果。有實驗使用伊紅染色劑均是伊紅Y（水溶），在長期的工作實踐中發現，采用不同的伊紅配置法所得的染液，HE染色效果差異明顯。

配制法^[1]

伊紅Y（水溶）的配制主要有兩種：

1）傳統法：取伊紅1g，加雙蒸水100ml，用玻璃棒充分攪拌溶解后，靜置過夜，過濾后待用，在使用前加入冰醋酸0.1ml。

2）改良法：取伊紅1g，加入雙蒸水100ml，用玻璃棒充分攪拌溶解后，加入濃鹽酸2ml，充分攪拌，靜置過夜，過濾，沉淀物用雙蒸水沖洗2次，然后將沉淀物連同濾紙放入恒溫干燥箱內充分干燥，濾液棄之不用。將已干燥的沉淀物置于燒杯中，加入95%乙200ml，攪拌溶解后待用，使用前用95%乙醇稀釋1倍，即再加入95%乙醇200ml。

主要參考資料

[1] 水溶性伊紅Y不同配置法對HE染色效果的影響